卵泡复苏方案，港股迎来向上周

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菌种是从事微生物学及生命科学研究的基本材料，其重要性不言而喻，冻干的细菌可以保存很长时间，通常情况下复苏不会有太大问题，我曾经复苏了一支30多年前冻干保存的菌株。但是对一些比较珍贵、比较难以获取的菌种，在复苏时也要注意，严格按照步骤进行操作。

1、准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行.准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与

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3、,章细胞培养的基本原理与技术现*试管物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术，而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系，特别是在医药领域的发展，细胞培养更具有特殊的作用和价值。

4、比如基因工程药物或**在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。基因工程乙肝**很多是以

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6、实验方法原理用机械法从细胞单层分离细胞，在27°C条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料Sf9细胞二甲基亚砜PluronicF68试剂、试剂盒生长培养液仪器、耗材培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤常规维持培养1.通过刮取法或用培养液冲洗细胞体外分化方法注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。

卵泡复苏方案

1、2-3的体积比混合均匀，2-4℃下平衡20-30min后，加入抗冻剂DMSO混匀得混合**，分装至离心管中，置于液氮液面上方4-7cm处平衡15-20min，然后再置于液氮液面上平衡5-8min，再放入液氮中保存;复苏：从液氮中取出装有**的离心管，置于液氮蒸汽中平衡5-10min，然后迅速置于37±1℃水浴中快速晃动至融化得解冻**;

2、马来酸地欧酮。实施例

3、亲本选择：选择形态正常、生长良好、健康无疾病、达到性成熟的花雄鱼作为亲本。取精：在花的繁殖期对性成熟的雄鱼注射催产剂，在水温16℃环境中暂养20h后，轻压鱼腹，用干净医用注射器获取无血污、无尿污的**，先用塑料细口吸管吸一滴水于载玻片上，对准视野，然后用针尖挑取上述**立即于显微镜下搅匀，观察其活力，鲜精活力在90%以上的**样品用于精子冷冻保存。

4、亲本选择：选择形态正常、生长良好、健康无疾病、达到性成熟的花雄鱼作为亲本。取精：在花的繁殖期对性成熟的雄鱼注射催产剂，在水温18℃环境中暂养16h后，轻压鱼腹，用干净医用注射器获取无血污、无尿污的**，先用塑料细口吸管吸一滴水于载玻片上，对准视野，然后用针尖挑取上述**立即于显微镜下搅匀，观察其活力，鲜精活力在90%以上的**样品用于精子冷冻保存。

卵泡复苏方案

1、无血清培养基serumfreemedium，SFM：是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。

2、一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水等几大类物质。

3、培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。

4、4加凝固剂配制固体培养基时需加凝固剂，如，琼脂、明胶等。

5、细胞铺板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。

6、转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90%。

7、ATCC收集了绝大多数细胞的详细资料。

8、别小看细胞培养，这里可蕴含着大学问。

9、这个概念虽然在本世纪初已经：40微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。

10、植物组织培养基中的矿质元素进入植物细胞后用于合成有机分子或作为酶反应中的催化剂。

11、采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免**污染造成的危害。

卵泡复苏方案用药

1、培养基制备

2、1器皿准备

3、2溶解培养基配料培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿，如，三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸管等，经洗涤、干燥、三代试管、灭菌后使用。

4、3调pH值先在烧杯中放适量水，按培养基配方称取各项材料，依次将缓冲化合物、主要元素、微量元素、维生素等材料加入水中溶解，较后加足水量，搅拌均匀。

5、4加凝固剂配料溶解后将培养基冷却至室温，根据要求加稀酸或稀碱10%氢氧化钠调pH值。加酸或碱液时要缓慢、少量、多次搅拌，防止局部过碱或过酸而导致测量不准确和营养成分被破坏。

6、5过滤分装配制固体培养基时需加凝固剂，如，琼脂、明胶等。将凝固剂加入液体培养基中，加热并不断搅拌至融解，再补足所蒸发水分。

7、6包扎标记在二层纱布中间夹入脱脂棉，将配好的培养基趁热过滤并分装。斜面培养基分装量约为试管高度的四分之一4～5mL，穿刺培养基分装量以试管高度的二分之一为宜。

8、7灭菌将试管加棉塞，外面包扎一层牛皮纸或铝箔并注明培养基名称及配制日期。

9、8斜面摆放根据要求将培养基灭菌，通常蒸汽灭菌为121℃，15～20min。